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北京中科斯麥實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司
北京市房山區(qū)良鄉(xiāng)拱辰大街98號(hào)財(cái)富廣場(chǎng)1062室
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新建微生物實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備及使用的注意事項(xiàng)
1,、超凈工作臺(tái)
微生物的培養(yǎng)都是在特定培養(yǎng)基中進(jìn)行無菌培養(yǎng),，那么無菌培養(yǎng)必然需要超凈工作臺(tái)提供一個(gè)無菌的工作環(huán)境。超凈工作臺(tái)的主要用途是微生物的接種及處理時(shí)的無菌操作,。
2,、無菌室（接種室）或接種箱
要培養(yǎng)微生物,，首先就需要接種，而接種必須在無菌條件下進(jìn)行,。這就需要建造無菌室或接種箱,，為接種創(chuàng)造必要的條件。無菌室可以建在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),，作為實(shí)驗(yàn)室的一個(gè)小套間,。面積為4~5平方米，高2.5米左右,。無菌室外應(yīng)連接一個(gè)小緩沖間,，面積為2平方米左右。緩沖間和無菌室的門不要建在同一條直線上,，以減少空氣中雜菌進(jìn)入無菌室,。無菌室和緩沖間應(yīng)作到清潔、密閉性好,，室內(nèi)最好有換氣設(shè)備,，以便在工作結(jié)束后更換室內(nèi)空氣。兩個(gè)房間中應(yīng)各安裝1盞30瓦紫外線燈管和照明用的日光燈,，無菌室的紫外線燈應(yīng)懸吊在工作臺(tái)的正上方,，距臺(tái)面1米,，以發(fā)揮最大的消毒功能。無菌室內(nèi)的工作臺(tái)等用具用品,，應(yīng)經(jīng)常保持清潔,，避免雜菌污染。如果沒有條件建造無菌室,，可以用木制的接種箱代替,。接種箱結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，容易制作,，其正面安裝玻璃,，便于觀察。箱前方開兩個(gè)圓洞各接連1只套袖,，操作時(shí)將兩臂從套袖伸入箱內(nèi)進(jìn)行操作,。箱內(nèi)也應(yīng)懸吊一盞紫外線殺菌燈和一盞日光燈。
3,、培養(yǎng)箱
培養(yǎng)箱有很多種類型,，它的用途在于為微生物提供一個(gè)適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。主要類型包括生化培養(yǎng)箱,，霉菌培養(yǎng)箱,，厭氧培養(yǎng)箱等。它們的區(qū)別主要在于：
a.生化培養(yǎng)箱只能控制溫度,。這類培養(yǎng)箱可作為一般細(xì)菌的平板培養(yǎng),。
b.霉菌培養(yǎng)箱可以控制濕度和溫度。它主要用在霉菌的培養(yǎng),。
c.CO2培養(yǎng)箱適用于厭氧微生物的培養(yǎng),，例如，雙歧桿菌,。
4,、天平
它是用于精確稱量各類試劑。實(shí)驗(yàn)室常用的是電子天平,，電子天平按照精度不同又有不同的級(jí)別,。
5、微生物均質(zhì)器
它的作用在于從固體樣品中提取細(xì)菌,。用微生物均質(zhì)器制備微生物檢測(cè)樣本具有樣品無損傷,、無污染、不升溫,、不需要洗刷器皿，不需滅菌處理等特點(diǎn),，是微生物實(shí)驗(yàn)中使用較為方便的儀器,。
6,、菌落計(jì)數(shù)器
菌落計(jì)數(shù)儀可幫助操作者計(jì)數(shù)菌落數(shù)量。通過放大,、拍照,、計(jì)數(shù)等方式準(zhǔn)確獲取菌落的數(shù)量。有些高性能的菌落計(jì)數(shù)器還可直接連接電腦來完成自動(dòng)計(jì)數(shù)的操作,，方便快捷的計(jì)數(shù),。
7、微波爐/電爐
它主要用于溶液的快速加熱,，微生物固體培養(yǎng)基的加熱熔化,。
8、高壓滅菌鍋
微生物學(xué)所用到的大部分實(shí)驗(yàn)物品,、培養(yǎng)基,、試劑都應(yīng)嚴(yán)格通過消毒滅菌。滅菌鍋也有不同的大小型號(hào),，有些是手動(dòng)的,，有些是全自動(dòng)的。用戶就要根據(jù)自己的需要選購,。
9,、移液器
它是用于精密量取各類液體。常見的液體量器有量筒,、微量取液器,、移液管、刻度試管,、燒杯等,。
10、冰箱
冰箱是實(shí)驗(yàn)室中保存試劑和樣品必不可少的儀器,。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中用到的試劑有些要求是4度保存,，有些要求是負(fù)20度保存，實(shí)驗(yàn)人員一定要看清試劑的保存條件,，放置在恰當(dāng)?shù)臏囟认卤４妗?/span>
具體來說,，不同溫度下保存的物品如下：
a.4℃適合儲(chǔ)存某些溶液、試劑,、藥品等,。
b.-20℃適用于某些試劑、藥品,、配好的抗生素等,。
c.-80℃適合某些長(zhǎng)期低溫保存的樣品、大腸桿菌菌種,、感受態(tài)等的保存,。
11,、生物安全柜
微生物實(shí)驗(yàn)中所涉及到的部分試劑和樣品微生物有些是有毒的，對(duì)于操作人員來說傷害比較大,。為了防止有害的懸浮微粒,、氣溶膠的擴(kuò)散，可以利用生物安全柜對(duì)操作人員,、樣品及樣品間交叉感染和環(huán)境提供安全的保護(hù)作用,。
12、搖床
搖床是實(shí)驗(yàn)室比較常用的一種儀器,，在微生物實(shí)驗(yàn)操作過程中,，液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需要在特定溫度下振蕩使用。
13,、純水裝置
純水裝置包括純水機(jī)和蒸餾水器,。蒸餾水器的價(jià)格比較便宜，但在造水過程中需要有人值守,；純水機(jī)價(jià)格高些,，但是使用方便，可以儲(chǔ)存一定量的純水,。純水的使用也有不同級(jí)別,，實(shí)驗(yàn)中配制試劑，配制培養(yǎng)基均都需用純水,。
14,、生物顯微鏡
由于微生物的體積比較小，所以在觀察時(shí)需要借助生物顯微鏡,。生物顯微鏡主要用于微生物和微小物品結(jié)構(gòu)和形態(tài)等方面的觀察,。
15、冷凍干燥機(jī)
主要適用于細(xì)菌,、微生物,、酵母等的干燥作用。用于干燥保存易脫水的產(chǎn)品,，在加水以后能夠再次恢復(fù)原材料的特性,，不影響其生物活性。通過冷凍干燥,，細(xì)菌之類的材料成為干燥狀態(tài),，從而不會(huì)發(fā)生化學(xué)改變。
16,、分光光度計(jì)
分光光度計(jì)在微生物試驗(yàn)中用于測(cè)定微生物懸液的濃度,，可以正確選取合適的培養(yǎng)時(shí)間。一般是在600nm波長(zhǎng)測(cè)定菌液濃度,。
17,、恒溫箱
用于恒溫條件下培養(yǎng)微生物,。恒溫箱的調(diào)溫范圍一般為20～45℃之間。培養(yǎng)酵母菌和霉菌時(shí),，一般可調(diào)至28℃，培養(yǎng)細(xì)菌和放線菌時(shí),，可根據(jù)菌種的生長(zhǎng)溫度進(jìn)行調(diào)溫,，一般為30～37℃。
18,、電烘箱（干燥箱）
用于玻璃器皿等物的烤干和滅菌,。電烘箱的調(diào)溫的范圍一般為40～180℃，對(duì)玻璃器皿等物進(jìn)行滅菌時(shí),，可將溫度調(diào)至160℃,，滅菌4小時(shí)，即可將器皿上的微生物全部殺死,。滅菌完畢后,，在電烘箱溫度還沒有降到50～70℃以前，不要打開電烘箱,，以免器皿破裂,。
19、恒溫水浴鍋
水浴鍋是一種控溫裝置,，水浴控溫對(duì)于樣品來說比較快速且接觸充分,。有些微生物反應(yīng)需要在37度，42度,，56度下水浴進(jìn)行,，所以恒溫水浴鍋可以提供需要的溫度。
20,、酸度計(jì)
用于配制試劑時(shí)精確測(cè)量pH值,，從而保證配制的溶液的精確性。有時(shí)也需要利用pH計(jì)測(cè)定樣品溶液的酸堿度,。
21,、離心機(jī)
用于收集微生物菌體以及其他沉淀物。離心機(jī)有冷凍和常溫之分,。有些樣品由于在常溫下不太穩(wěn)定,，需要低溫環(huán)境，要視樣品的種類而定,。
離心機(jī)清洗要求：在離心機(jī)內(nèi)腔,，設(shè)置多個(gè)清洗頭或清洗管，離心機(jī)可在不開蓋或運(yùn)轉(zhuǎn)過程中對(duì)離心機(jī)內(nèi)部進(jìn)行清洗,。
重點(diǎn)有以下幾個(gè)部位：①轉(zhuǎn)鼓底面及軸承座部位的清洗,；②攔液板表面及轉(zhuǎn)鼓筒體外表面,；③轉(zhuǎn)鼓筒體內(nèi)表面；④翻蓋內(nèi)表面及進(jìn)料,、刮刀等裝置表面,；⑤外殼內(nèi)表面。
離心機(jī)維護(hù)規(guī)則：
（1）一次規(guī)則
當(dāng)系統(tǒng)出了故障,，你可以試探性地改變某些狀態(tài),，一次可以改變一個(gè)參數(shù)。做一些簡(jiǎn)單的改變步驟,，也許就能解決問題,。
（2）二次比較規(guī)則
在動(dòng)手檢修之前已經(jīng)明確了故障所在，或者已經(jīng)確定了解決故障的方案,。換句話說,，動(dòng)手之前已經(jīng)找對(duì)了解決辦法。例如,，在進(jìn)樣過程中發(fā)現(xiàn)內(nèi)標(biāo)物的峰值變低了,，可以重復(fù)進(jìn)樣看看重復(fù)性如何，如果是偶然變低,，是否是定量管里進(jìn)了氣泡,。這個(gè)規(guī)則可用于考察系統(tǒng)改變后的情況。更換了流動(dòng)向后在正式進(jìn)樣前可以進(jìn)兩次標(biāo)準(zhǔn)品以檢查保留時(shí)間的穩(wěn)定情況和色譜峰的穩(wěn)定性,。在梯度洗脫中如果出現(xiàn)了多余的峰,，可以空載梯度洗脫一次，用此規(guī)則可以避免不必要的改變,，盡快確定糾正措施,。
（3）取代規(guī)則
用好的部件換下可疑的部件，是查找故障的最好方法,。如果你懷疑檢測(cè)器引起了噪音,，就換一個(gè)性能好的無轉(zhuǎn)子硫化儀檢測(cè)器。如果故障被排除了,，就說明換下的檢測(cè)器有問題,。這個(gè)規(guī)則應(yīng)用的規(guī)模有大有小，可以從換整個(gè)部件到換印刷線路板上的集成塊,。
（4）換回規(guī)則
這個(gè)規(guī)則和取代規(guī)則一起運(yùn)用,，好部件取代了溶體流動(dòng)速率測(cè)定儀可疑部件后情況并未得到改善，應(yīng)重新?lián)Q上原部件,。這樣做的維修費(fèi)用最小,，也防止了用過的部件積壓下來無轉(zhuǎn)子硫化儀。這條規(guī)則僅適用于單一的故障。
換回原則不適用于以下的情況：
①在取下時(shí)新部件已損壞（如泵密封墊圈）,；
②部件價(jià)格低（如柱內(nèi)襯過濾片）,；
③重新裝上原部件要冒損壞的風(fēng)險(xiǎn)；
④定期更換的部件,。
22,、液氮罐
液氮罐儲(chǔ)存液氮，可用于細(xì)菌,、酵母,、霉菌和大型真菌等各種微生物的長(zhǎng)期保存。
23,、接種針
用于接種和分離微生物。根據(jù)不同用途做成針狀,、環(huán)狀,、鉤狀、刀狀和鏟狀等,。接種針由針頭和針柄兩部分組成,。針頭由白金或鉻鎳合金（細(xì)電爐絲）制成，長(zhǎng)約7厘米,。針柄可用玻璃棒或鋁管制成,，長(zhǎng)約20厘米。將針頭燒結(jié)在針柄上即成,。
24,、酒精燈
用于接種時(shí)對(duì)接種工具進(jìn)行滅菌。酒精燈火焰上部熱度最高,，應(yīng)利用這一最高溫度區(qū)燒灼接種針或試管口,。
25、均質(zhì)器
均質(zhì)器使樣品處理過程中不可缺少的設(shè)備,。常用的均質(zhì)器主要是旋轉(zhuǎn)均質(zhì)器和拍擊式均質(zhì)器,。旋轉(zhuǎn)式均質(zhì)器是靠旋轉(zhuǎn)的刀片將均質(zhì)杯中的樣品打碎。缺點(diǎn)是每次均質(zhì)都要更換刀片和均質(zhì)杯,，樣品易受到污染,，均質(zhì)過程中容易產(chǎn)生熱量使樣品中的微生物受損。拍擊式均質(zhì)器使用無菌均質(zhì)袋,，拍擊的機(jī)械裝置作用在均質(zhì)袋上,，不和樣品直接接觸，因此不會(huì)受污染,。拍擊式均質(zhì)器由于使用方便,，不易受污染，使用越來越廣泛。但其缺點(diǎn)是均質(zhì)的力量不足,，對(duì)于堅(jiān)硬的樣品不但無法均質(zhì)均勻,，還會(huì)引起均質(zhì)袋的破損。
使用注意事項(xiàng)：
（1）使用前先將電源插頭固定牢靠后,，再打開機(jī)器開關(guān),。插頭不能使其出現(xiàn)松動(dòng)，因?yàn)闄C(jī)器工作時(shí)會(huì)產(chǎn)生振動(dòng)導(dǎo)致插頭脫落,。這種突然短點(diǎn)對(duì)機(jī)器會(huì)造成損傷,。
（2）均質(zhì)器工作時(shí)不準(zhǔn)隨便打開均質(zhì)器門，防止樣液飛濺（有的均質(zhì)器打開門以后自動(dòng)停止拍擊均質(zhì)）,，一定要先關(guān)機(jī)器再開門,，然后同樣關(guān)閉門之后再開機(jī)。
（3）使用均質(zhì)器之前,，一定要檢查均質(zhì)器內(nèi)是否有異物,，防止損傷機(jī)械裝置或均質(zhì)袋。
（4）堅(jiān)硬樣品,，盡量不要用拍打式均質(zhì)器,，防止均質(zhì)袋破裂，冷凍樣品需緩化解凍以后才能使用拍擊式均質(zhì)器,。當(dāng)一定要拍打堅(jiān)硬樣品時(shí),，最好加套均質(zhì)袋。
（5）均質(zhì)器的底部是空的,，如遇均質(zhì)袋意外破裂時(shí),，方便清理溢出物。
（6）均質(zhì)器和均質(zhì)袋放置在陰涼干燥處,，特別是均質(zhì)袋應(yīng)避酸堿,、避陽光，防止其過早的變脆老化,。
（7）均質(zhì)器用完之后,，先關(guān)機(jī)斷電，然后將其內(nèi)外清理干凈,。
（8）對(duì)于一些拍打均質(zhì)后,，容易堵塞移液管或移液器槍頭的樣品，建議使用帶過濾網(wǎng)的無菌均質(zhì)袋,。
26,、常用玻璃器皿
①培養(yǎng)皿（平皿）：用于盛放固體培養(yǎng)基，是培養(yǎng)微生物和觀察微生物的主要器皿,。一般直徑為9厘米,。可根據(jù)活動(dòng)規(guī)模準(zhǔn)備若干個(gè)。
②試管：用于盛放斜面培養(yǎng)基（固體）,，是接種微生物的主要器皿,。常用的有兩種。較大的長(zhǎng)220毫米,，直徑20毫米,；較小的長(zhǎng)150毫米，直徑15毫米,?？筛鶕?jù)需要選用其中一種并準(zhǔn)備若干個(gè)。
③錐形瓶：用于盛放液體培養(yǎng)基,。是用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物的主要器皿,。一般容量為50、100,、250,、300、500,、1000毫升?？筛鶕?jù)活動(dòng)需要選擇和準(zhǔn)備,。
④量筒、量杯：用于定量量取各種液體,。
⑤移液管（吸管）：一般容量為0.5,、1、5,、10毫升等,，可根據(jù)需要選擇和準(zhǔn)備。
⑥其它：燒杯,、漏斗等,。注意事項(xiàng)：以上介紹的是微生物實(shí)驗(yàn)室的基本儀器配置，在組建實(shí)驗(yàn)室時(shí)還需要其他一些耗材,，例如試管架,，無菌采樣及稱樣袋，接種環(huán),，三角瓶,，量筒，脫脂棉,，紗布,，試管筐，玻璃試管，滅菌吸管,，涼干架,，剪刀，鑷子,，過濾器等,。